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    (AGT)ELISA檢測(cè),犬血管緊張素原ELISA試劑盒操作步驟

    更新時(shí)間:2018-08-03      瀏覽次數(shù):3018

    犬血管緊張素原(AGT)ELISA試劑盒

    英文名稱:Canine AGT ELISA Kit
    實(shí)驗(yàn)類型:夾心法
    檢測(cè)范圍:12.5 pg/mL – 400 pg/mL
    低檢測(cè)限:1.0 pg/mL
    應(yīng)用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研及非臨床用途)

    操作步驟

    1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

    2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

    3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。

    4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

    5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

    6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

    7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

    注意事項(xiàng)

    1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

    2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。

    3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

    4. 底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

    5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。

    6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。

    7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

    8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

    9. 不能使用過(guò)期產(chǎn)品。

    10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。

     

    洗板方法

    手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。

    自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。

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