昆蟲(chóng)ELISA試劑盒操作流程細(xì)則

昆蟲(chóng)ELISA試劑盒中文簡(jiǎn)稱：酶聯(lián)免疫法或酶免法問(wèn)：什么是種屬？什么是樣本？答：①種屬就是所謂的，客戶測(cè)得樣本來(lái)源是從什么動(dòng)物，植物，人，等，提取
的樣本，針對(duì)每個(gè)種屬有想對(duì)應(yīng)的試劑盒，例如，從人的部位，收集的樣本，種屬就是人。那試劑盒就是測(cè)人的什么什么指標(biāo)？動(dòng)物的就測(cè)動(dòng)物的什么指標(biāo)等等。
②客戶從種屬身上提取的，包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿，唾液等標(biāo)本，（能溶的一般情況下都可以測(cè)）
昆蟲(chóng)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)操作流程如下：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)
胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙
上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）昆蟲(chóng)ELISA試劑盒每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）昆蟲(chóng)ELISA試劑盒分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥21為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。