植物吲哚乙酸（IAA）ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)類型：夾心法

更新時(shí)間：2018-12-26

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植物吲哚乙酸(IAA)ELISA試劑盒

英文名稱：Plant IAA ELISA Kit
實(shí)驗(yàn)類型：夾心法
檢測(cè)范圍：0.625 μmol/L – 20 μmol/L
低檢測(cè)限：0.1 μmol/L
應(yīng)用范圍：血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體（本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研及非臨床用途）

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被植物吲哚乙酸（IAA）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物吲哚乙酸（IAA）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

植物吲哚乙酸(IAA)ELISA試劑盒組成

試劑盒組成	96孔配置	48孔配置	備注
微孔酶標(biāo)板	8孔×12條	8孔×6條	無(wú)
標(biāo)準(zhǔn)品	0.3mL×6管	0.3mL×6管	無(wú)
樣本稀釋液	6mL	3mL	無(wú)
檢測(cè)抗體-HRP	10mL	5mL	無(wú)
20×洗滌緩沖液	25mL	15mL	按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋
底物A	6mL	3mL	無(wú)
底物B	6mL	3mL	無(wú)
終止液	6mL	3mL	無(wú)
封板膜	2張	2張	無(wú)
說(shuō)明書	1份	1份	無(wú)
自封袋	1個(gè)	1個(gè)	無(wú)

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。