羥自由基清除能力測(cè)試盒測(cè)定原理

羥自由基清除能力測(cè)試盒測(cè)定原理

測(cè)定意義：羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、脂類等生物分子，造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損，進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一，在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。
測(cè)定原理：H2O2/ Fe2+ 通過(guò)Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基，將鄰二氮菲- Fe2+水溶液中Fe2+氧化為Fe3+ ，導(dǎo)致536nm吸光度下降，樣品對(duì)536nm吸光度下降速率的抑制程度，反映了樣品清除羥自由基的能力。
需自備的儀器和用品：可見(jiàn)分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。

產(chǎn)品說(shuō)明： 羥自由基是人體在新陳代謝過(guò)程中產(chǎn)生的對(duì)生物體毒性強(qiáng)、危害大的一種自由基。它可以使組織中的糖類、 氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)發(fā)生氧化，遭受氧化性損傷和破壞，導(dǎo)致細(xì)胞壞死或突變。羥自由基清除能力是樣 本抗氧化能力的重要指標(biāo)之一，在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。 H2O2/Fe 2+通過(guò)Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基，將鄰二氮菲-Fe 2+水溶液中Fe 2+氧化為Fe 3+，導(dǎo)致536nm的吸光度下降， 樣本536nm吸光度下降速率的抑制程度，反映了樣本清除羥自由基的能力。
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注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例： 1、 取 0.1g 腎臟加入 1mL 提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算：羥自由基清除率 D%= （A 測(cè)-A 對(duì)）÷（A 空-A 對(duì)）×100%=(0.889-0.209)÷(0.959-0.209)×100%=90.67%。 2、 取 0.1g 稗草葉加入 1mL 提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算：羥自由基清除率 D%= （A 測(cè)-A 對(duì)）÷（A 空-A 對(duì)）×100%=(0.796-0.209)÷(0.959-0.209)×100%=78.27%。 3、 取兔血清后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算：羥自由基清除率 D%=（A 測(cè)-A 對(duì)）÷（A 空-A 對(duì)） ×100%=(0.629-0.209)÷(0.959-0.209)×100%=56%。