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    上海仁捷生物發(fā)布-豬(NGAL2)elisa檢測(cè)原理

    更新時(shí)間:2017-06-29      瀏覽次數(shù):1859

    豬中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2NGAL2試劑盒(ELISA)試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包豬中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2NGAL2)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2NGAL2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

    試劑盒組成:

     

    名稱(chēng)

    96孔配置

    48孔配置

    備注

    微孔酶標(biāo)板

    8孔×12

    8孔×6

    無(wú)

    標(biāo)準(zhǔn)品

    0.3mL*6管

    0.3mL*6管

    無(wú)

    樣本稀釋液

    6mL

    3mL

    無(wú)

    檢測(cè)抗體-HRP

    10mL

    5mL

    無(wú)

    20×洗滌緩沖液

    25mL

    15mL

    按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋

    底物A

    6mL

    3mL

    無(wú)

    底物B

    6mL

    3mL

    無(wú)

    終止液

    6mL

    3mL

    無(wú)

    封板膜

    2張

    2張

    無(wú)

    說(shuō)明書(shū)

    1份

    1份

    無(wú)

    自封袋

    1個(gè)

    1個(gè)

    無(wú)

    1.  標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:240、120、60、30、15、7.5 pg/mL

    2.  經(jīng)過(guò)大量正常標(biāo)本檢驗(yàn),標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測(cè)范圍內(nèi),實(shí)驗(yàn)過(guò)程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過(guò)zui大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí),可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

     

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

    所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),并得到直線(xiàn)回歸方程將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品濃度。(例如下圖)

     

    試劑盒性能

    •  檢測(cè)范圍7.5 pg/mL  240 pg/mL
    •  靈敏度:zui低檢測(cè)濃度小于1.0 pg/mL
    •  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。
    •  重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 
    •  

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